微流控流式細胞儀作為細胞分析領域的革新性工具,其核心技術貫穿流體操控、光學檢測與信號處理全鏈條,通過微米級流體通道與高精度檢測系統的協同,實現了對單細胞的快速、精準分析。
流體操控技術是微流控流式細胞儀的基礎。其核心在于利用微米級通道的流體動力學特性,通過鞘液包裹與流速差控制,將細胞懸液聚焦成單細胞流。例如,微毛細管技術通過負壓區形成穩定的單細胞上行流,確保每個細胞獨立通過檢測區域,最小樣本量可低至1000個細胞,且運行8小時僅產生50ml廢液。此外,聲電泳(AP)、介電泳(DEP)等主動聚焦技術進一步提升了細胞排列的精確性,為后續檢測提供穩定信號源。
光學檢測系統是細胞信息獲取的關鍵。激光束垂直照射單細胞流,產生前向散射光(FSC)和側向散射光(SSC),分別反映細胞大小和內部顆粒度。例如,低SSC信號可區分淋巴細胞與高SSC的粒細胞。同時,系統集成多色熒光檢測模塊,通過帶通濾光片(如690/50nm)精準匹配熒光染料激發/發射光譜,結合光電倍增管(PMT)或CMOS傳感器,實現多參數同步檢測,單細胞分析參數可達數十個。
信號處理與分析技術則賦予儀器智能化決策能力。芯片上集成的電子系統對散射光和熒光信號進行實時放大與模數轉換,通過阻抗相位角-振幅散點圖區分活細胞與死細胞,或利用深度學習算法自動化識別細胞亞群。例如,在癌癥診斷中,系統可高通量檢測循環腫瘤細胞(CTC),并通過阻抗數據快速量化腫瘤細胞活性,為治療提供依據。
這些核心技術的融合,使微流控流式細胞儀在稀有細胞檢測、床旁診斷及資源有限地區推廣中展現出優勢,成為精準醫療與生物醫學研究的重要工具。