微流控流式細胞儀通過將微流控技術(shù)與流式細胞術(shù)相結(jié)合，實現(xiàn)了細胞分選與下游分析功能的高度集成，其核心原理與實現(xiàn)方式如下：

　　一、核心原理：微尺度下的精準操控

　　微流控流式細胞儀利用微米級通道（1-1000μm）實現(xiàn)流體的精準操控，結(jié)合流式細胞術(shù)的熒光檢測與分選能力，形成“檢測-分選-分析”一體化流程。其關(guān)鍵技術(shù)包括：

　　層流控制：微通道內(nèi)流體呈層流狀態(tài)（雷諾數(shù)Re<1），細胞運動軌跡穩(wěn)定可預(yù)測，避免傳統(tǒng)方法中的湍流干擾。

　　熒光激活分選（FACS）：通過熒光標記細胞表面抗原或內(nèi)部物質(zhì)，激光激發(fā)后產(chǎn)生散射光和熒光信號，經(jīng)光電倍增管轉(zhuǎn)換為電信號，計算機處理后識別目標細胞。

　　物理分選機制：利用細胞大小、密度、彈性等物理特性，通過微柱陣列、慣性聚焦、聲表面波（SAW）等技術(shù)實現(xiàn)無標記分選。

　　二、功能集成：從分選到分析的全流程

　　樣本預(yù)處理與進樣

　　微流控芯片集成樣本過濾、稀釋等功能模塊，細胞懸液經(jīng)鞘流包裹后形成單列流，通過高壓或電動力驅(qū)動進入檢測區(qū)域。

　　高通量檢測與分選

　　熒光檢測：激光束垂直照射細胞流，散射光反映細胞體積，熒光信號強度代表抗原或核內(nèi)物質(zhì)濃度。

　　分選執(zhí)行：根據(jù)檢測結(jié)果，通過電場、光鑷、PDMS微閥或相變閥等控制細胞流向。例如，電場切換可使帶電細胞偏轉(zhuǎn)至不同收集池；光鑷技術(shù)通過激光捕獲與移動實現(xiàn)微米級精確定位。

　　下游分析集成

　　實時形變分析：集成高速成像模塊，實時拍攝細胞形變、亮度、尺寸等參數(shù)，結(jié)合熒光信號進行多維度分析。

　　封閉式操作：樣本從進樣到分析全程封閉，減少污染與操作誤差，提升數(shù)據(jù)可靠性。

　　三、技術(shù)優(yōu)勢：高效、精準、低成本

　　高通量處理：陣列式并行通道設(shè)計支持每小時處理超50個樣本，分選10?個細胞僅需10分鐘。

　　高純度與回收率：分離純度達95%-99.9%，回收率超90%，細胞活性保留率超95%。

　　低成本與易用性：芯片批量生產(chǎn)降低單次分離成本（為傳統(tǒng)方法的1/5-1/10），自動化操作減少人工誤差，適合工業(yè)級細胞制備。

　　四、應(yīng)用場景

　　循環(huán)腫瘤細胞（CTCs）檢測：通過DLD技術(shù)分選直徑20μm的CTCs，純度達99%以上。

　　免疫細胞治療：分選高活性CD8?T細胞，縮短擴增周期2-3天，降低培養(yǎng)成本。

　　干細胞研究：高效處理微量活檢樣本，避免因樣本量不足導(dǎo)致的實驗失敗。